Bioanalytische Massenspektrometrie-Plattform für Lipidmediator-Analytik
Lipidmediatoren zeigen bereits in kleinsten Mengen biologisch-relevante Effekte. Gleichzeitig existiert jedoch eine hohe Anzahl an chemisch-verwandten, aber biologisch-inaktiven Molekülen (Isomere). Die wissenschaftlich-belastbare Detektion und Quantifizierung pikomolarer Mengen chemisch-verwandter Lipidmediatoren aus komplexen Proben erfordert daher eine hoch-sensitive und hoch-selektive Analytik. Wir entwickeln, optimieren und validieren bioanalytische Methoden, um Lipidmediatoren anhand ihrer Lipophilie, dem Verhältnis der Masse-zur-Ladung, sowie ihres Fragmentierungsmusters separieren zu können. Hierfür nutzen wir unterschiedliche Probenaufbereitungsverfahren wie Festphasen- (SPE) oder Flüssig-Flüssig-Extraktion (LLE) in Kombination mit modernen Ultrahochleistungs-Chromatographie-Systemen (UPLC) und Tripelquadrupol-basierten Tandem-Massenspektrometern (MS/MS). Wir extrahieren die darin enthaltenen Lipide und bestimmen den Gehalt einzelner mehrfach-ungesättigter Fettsäuren (PUFA), Prostaglandine (PG), Leukotriene (LT), spezialisierter pro-resolvierender Mediatoren (SPM) sowie anderer Fettsäure-Metabolite. Schließlich bieten wir die systematische und statistische Auswertung komplexer Lipidmediator-Netzwerke und Oxylipin-Signaturen an (Metabololipidomics).